Localisé au sein du Centre de Biologie et de Recherche en Santé, le plateau de microscopie en fluorescence de BISCEm est ouvert à l’ensemble des laboratoires de l’université de Limoges ainsi qu’aux structures extérieures, qu’elles soient publiques ou privées.

Il met à disposition des utilisateurs des systèmes de microscopie de fluorescence et d’analyse d’images en utilisation libre (après formation) ou assistée par l’ingénieur de la plateforme :

  • 1 microscope en incubateur
  • 1 microscope confocal
  • 1 macroscope confocal
  • 1 microscope plein champ
  • 1 logiciel de déconvolution
  • des logiciels d’analyse d’image
Equipement :
  • Microscope inversé motorisé en x,y placé dans un incubateur
  • Objectifs x4 /x10/x20
  • brightfield
  • Fluorescence verte (λexc 440-480 nm / λem 504-544 nm) ; rouge (λexc 565-605 nm / λem 625-705nm)
Types d’échantillons :

Cellules en culture, adhérentes ou en suspension.

Applications :

Acquisitions automatisées au cours du temps (jusqu’à plusieurs jours)

  • Suivi de la migration cellulaire
  • Mesure de viabilité cellulaire
  • Réalisation de cinétiques …
Equipement :
  • Microscope droit motorisé en x,y et z
  • Objectifs x4/x20/x40/x100
  • 5 cubes filtres : Dapi/FITC/TRITC/Texas Red/Cyanine5
  • 1 camera couleur, 1 camera noir et blanc (Fluorescence),
  • une platine motorisée 8 lames.
  • Logiciel NIS Elements AR avec module JOBS (pour automatisation des acquisitions).
Types d’échantillons :

Coupes de tissus et cellules fixées entre lame et lamelle, colorées ou fluorescentes.

Nikon NiE

Applications :
  • Mosaïques d’images (pour acquisition de coupes complètes de tissus, par exemple)
  • Acquisitions en z puis déconvolution des images avec le logiciel Huygens disponible sur la plateforme.
  • Possibilité d’automatiser les acquisitions et d’associer les « dimensions » entre elles (fluorescences / multipositions /z stacking / mosaïques…)  (Exemple : programmation d’acquisition de mosaïques sur des coupes de tissu à raison de 2 coupes par lame, possibilité de moduler les paramètres d’acquisitions en terme de nombre de fluorescences acquises et/ou temps d’exposition de la caméra en fonction des coupes…)
  • ELISPOT sur plaque 96 puits et analyse du nombre et de la taille des spots.
Illustrations :

CRIBL – UMR CNRS 7276 Inserm 1262

Coupe de rate de souris

Bleu : cellules B / Rouge : zone folliculaire / Jaune : centres germinatifs / 

Peirene EA7500 – USC 1061

Coupe de muscle squelettique

Typage de fibres musculaires

Bleu : type I / Vert : type IIb / Rouge : type IIa

CRIBL – UMR CNRS 7276 Inserm 1262

FISH 3D

Bleu : noyau / Vert et Rouge : sonde IgL et IgH

Equipement :
  • Microscope inversé motorisé en x,y et z,
  • Objectifs x10, x20, x40, x63
  • 6 raies laser 405/458/488/514/561/633,
  • 1 détecteur spectral,
  • 1 chambre d’incubation régulée en T° et CO2.

Types d’échantillons :

Coupes de tissus, cellules vivantes ou fixées, animales, végétales, biofilms bactériens, matériaux.

Zeiss LSM880

Applications :
  • Acquisitions en 2D, 3D, 4D
  • Mosaïques d’images en 2D et 3D
  • Imagerie spectrale (acquisitions des spectres de fluorescence pour multiplexage et/ou identification des signaux de fluorescence endogène)
  • Etude de colocalisation
Illustrations :

Peirene EA7500

Boues de station d’épuration  en 3D

Vert : bactéries vivantes / Rouge : bactéries mortes / Bleu : autofluorescence

MMNP EA6309

Astrocytes en culture.

Bleu : le noyau / Rouge : la « glial fibrillary acidic protein » (GFAP) / Vert : la vimentine

CRIBL – UMR CNRS 7276 Inserm 1262

Coupe de rate de souris

Vert : chaine J GFP / Rouge : Lymphocytes B activés / Bleu : zone folliculaire

Peirene EA7500

Autofluorescence, coupe de duramen, pin de Douglas

Fluorescence émise entre 405nm et 700nm après excitation à 405nm, 488nm, 561nm et 633nm.

Equipement :
  • Macroscope droit motorisé en x,y et z,
  • Grossissements x1 à x32.
  • 3 cubes filtres Dapi/FITC/ TRITC/Cy5. Camera noir et blanc, module confocal (CREST),
  • Logiciel NIS Elements AR.

Types d’échantillons :

Gros échantillons : petits modèles animaux (poisson zèbre, fourmi…), plantules, racines, coupes épaisse de tissus, céramiques, matériaux…

Nikon AZ100 + tête CREST

Applications :
  • Acquisitions 2D et 3D
  • Mosaïques d’images en 2D et 3D
Illustrations :

Peirene EA7500

Racine de tomate, Apex

CAPTUR EA3842 / IRCER

Cellules pré-ostéoblastiques murines marquées pour l’actine (rouge) et le noyau (bleu) cultivées sur pastille de céramique phosphocalcique fabriquée par microstéréolithographie.

ECOLE DE MICROSCOPIE DU BOIS 2018

Boiserie en chêne et échantillon de bois

Déconvolution des images : Logiciel Huygens

Applications :

Amélioration de la qualité des images obtenues avec les microscopes de fluorescence à partir du calcul de fonction d’étalement du signal (Point Spread Function)

Illustration :

F.I .S.H. Lymphocytes B activés

Logiciels d’analyse d’images : Volocity, NiS-Elements AR, Image J, Imaris

Applications :

Quantifications en

2D (nombre d’objets, surface, distances, colocalisation…),

3D (nombre d’objets, volumes, distances, colocalisation, arborescences…),

4D (trajectoires, vitesse…)

Illustration :

RESINFIT UMR Inserm 1092

Analyse de la composition de biofilms bactériens

Appareils accessibles en collaboration avec la plateforme PLATINOM (plateforme de l’Institut de Recherche XLIM UMR CNRS 7252 et service commun de l’Université de Limoges)

  • Microscope Multiphotonique (Olympus)

Appareils accessibles en collaboration ou via des prestations avec la plateforme CarMaLim (plateforme du laboratoire IRCER UMR CNRS 7315 et service commun de l’Université de Limoges)

  • Microscopes Electroniques (en transmission ou à balayage)  :  ZEISS Super Crossbeam FIB (en partenariat avec Xlim);  Jeol 7400F (système cryogénique);  FEI quanta 450 FEG ESEM
  • Microscope à Force Atomique : Brucker Icon
  • Spectroscope Raman 3D :   Renishaw Invia Reflex

Microscopie multimodale (2PEF, 3PEF, SHG, THG, Raman, CARS, analyse spectrale haute résolution)
Leica SP8  + Coherent Chameleon Ultra II 680-1080 nm et OPO Chameleon MPX 1050 – 1350 nm + Princeton Instruments BLAZE 100 HRX et Isoplane SCT-320

En partenariat avec les plateformes PLATINOM et CARMALIM (pour toute demande concernant cet équipement : )

Modalités d'accès

N’hésitez pas à prendre contact avec le plateau () pour plus d’information sur les conditions d’utilisation et les possibilités d’analyses que nous pouvons vous offrir.

Pour les utilisateurs autonomes, un calendrier de réservation est mis à disposition à cette adresse.

Pour toute demande ou réservation, un code projet vous sera demandé. Si vous n’en avez pas, merci de remplir le formulaire de dépôt de projet (utilisateurs de l’Université de Limoges uniquement). Pour les utilisateurs extérieurs, merci de prendre contact avec BISCEm pour l’attribution de votre code projet.