Th̬se soutenue РDum̬tre Aur̩lien

Resumé :

La toxoplasmose est une anthropozoonose d’importance médicale et vétérinaire, due au protozoaire Toxoplasma gondii. Les oocystes, émis par les félins, ont un rôle central dans la transmission du parasite en contaminant les animaux d’élevage, les végétaux et l’eau consommés par l’homme. Au cours de ce travail, nous avons développé deux approches pour préciser la circulation des oocystes dans l’environnement : (i) la détection des oocystes dans l’eau par une nouvelle méthode, la séparation immunomagnétique (IMS), et (ii) la recherche du parasite dans des réservoirs animaux soumis à une infection par les oocystes (animaux d’élevage et sauvages). Pour l’IMS, nous avons produit et caractérisé deux nouveaux anticorps monoclonaux (AcM 3G4 et 4B6) dirigés contre la paroi des oocystes. 3G4 reconnaît des antigènes de 58 et 67-69 kDa, et 4B6 un antigène >116 kDa spécifique de l’oocyste sporulé. Ces deux AcM ont une réactivité croisée avec d’autres coccidies autofluorescentes et phylogénétiquement proches de T. gondii. Ils ont été intégrés dans une IMS expérimentale, mais seul 4B6, plus spécifique que 3G4, a été retenu pour une application en conditions naturelles. Cinquante prélèvements d’eaux de surface, prélevés dans des contextes épidémiologiques particuliers, ont été analysés par filtration, IMS-4B6, IFI, bioessai et PCR en temps réel. Aucun toxoplasme n’a été mis en évidence avec certitude. Parallèlement, l’analyse de 639 sérums d’animaux d’élevage et sauvages montre, chez quatre espèces potentiellement soumises à une infection par les oocystes en Limousin, une séroprévalence de 20,6% à 59,1% chez les ovins, de 27,5% chez les bovins, de 18,5% chez le poulet de plein air et de 20,4% chez le ragondin. Des toxoplasmes, de génotype II, ont pu être isolés. Ce travail contribue à préciser la séroprévalence de la toxoplasmose dans les réservoirs animaux et propose des améliorations techniques et stratégiques pour détecter les oocystes par IMS. Ces résultats préliminaires devront être poursuivis par des études épidémiologiques plus extensives.

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Mots clés : toxoplasmose, épidémiologie, toxoplasma gondii, anticorps